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대부분의 인간과 동물로부터 분리한 세포(Primary cell line)는 세포배양에서 계속 자라지 못하고 제한된 수의 분열을 한 후 Primary cell들은 성장을 정지하는데 이를 in vitro의 세포복제의 노화(replicative senescence)라고 합니다. 분리한 세포를 어떤 조건하에서 배양하면 정상세포로 무한 증식할 수 있는 능력을 지니는데 이를 불멸화 세포(immortalized cell)라 합니다. 그리고 이를 세포 수립주 라고도 합니다. 정상적인 세포는 자연적으로 또는 virus의 감염, mutagen 처리 등의 여러 인공적인 방법에 의하여 불멸화하여 암으로 진행할 수 있습니다. 본 연구실에서는 Epstein-Barr virus(EBV)를 이용하여 viral transformation을 함으로써 불멸화 세포를 배양합니다. EBV는 herpes family에 속하는 human virus로서 170kb의 genome으로 구성되어 있습니다. EBV가 감염되는 세포는 주로 B cell이며, EBV는 제한적 target cell-tropism을 나타냅니다. 본 연구실에서 불멸화 세포주를 만드는 과정은 인간의 혈액으로부터 PBMC(Peripheral Blood Mononuclear Cell)를 분리한 뒤에 EBV를 처리해주고, CO2(0.5%) 인큐베이터에서 배양합니다. 불멸화 과정이 제대로 진행되면, PBMC 세포의 크기와 모양이 변합니다. 안정된 불멸화 세포주들의 경우에 부합하여야 하는 조건들로는 연장된 수명(extended life span), 안정적인 genotype(stable genotype), Tissue source의 markers들에 대한consistent expression등이 있고, EBV에 의해 제조된 B-lymphoblastoid cell line(BLCL)은 면역학적 및 유전학 연구에서 다양한 목적으로 사용 됩니다.  본 연구실에서는 불멸화 과정을 통해 만들어진 세포는 다량으로 증식 시켜서 DNA를 분리하여 전혈에서 추출한 DNA와 유전형 분석을 동시에 진행하여 동일한 유전형이 나오는지 검사하고, 분석된 불멸화 세포주 DNA는 유전형 분석 시 well-known control로써 사용될 뿐만 아니라, 특정 SNP(single nucleotide polymorphism)이나 특정 haplotype을 연구하는데 사용하고 있습니다.  |
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